|  |
pg2013.ru / Указ
"Методические указания по измерению концентраций дикамбы в воздухе рабочей зоны газожидкостной и тонкослойной хроматографией. МУК 4.1.1453-03"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24.06.2003)
Официальная публикация в СМИ:
"Сборник методических указаний", выпуск 4, М., Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
24 июня 2003 года
Дата введения:
30 июня 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ, ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДИКАМБЫ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
МУК 4.1.1453-03
1. Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина), Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгилевич) при участии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.П. Веселов).
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. Введены впервые.
Структурная формула (не приводится).
C H Cl O
8 6 2 3
М. м. 221,05.
Дикамба - гербицид широкого спектра действия. Действующее
начало препаратов на основе дикамбы (дианат, банвел-Д, дифезан)
2-метокси-3,6-дихлорбензойная кислота. В чистом виде - белое
кристаллическое вещество с Т 114 - 116 °С. Разрушается при
пл.
температуре около 200 °С. Давление паров при 25 °С 4,5 мПа
-5
(3,4 х 10 мм рт. ст.). Растворимость в воде 6,5 г/л, ацетоне -
810 г/л (при 25 °С), хорошо растворима в спиртах, хлороформе,
диэтиловом эфире.
В воздухе рабочей зоны может находиться только в виде
аэрозоля.
Относится к малотоксичным препаратам. LD для теплокровных
50
1700 - 2000 мг/кг. Не проявляет тератогенного и мутагенного
действия.
ПДК дикамбы в воздухе рабочей зоны 1 мг/куб. м.
1. Характеристика метода
Метод ГЖХ основан на получении метилового эфира 2-метокси-3,6-дихлорбензойной кислоты путем взаимодействия дикамбы с диазометаном с последующим газохроматографическим определением на приборе с детектором по "захвату электронов".
Метод ТСХ основан на хроматографическом выделении дикамбы в тонком слое сорбента на пластинках силуфол или сорбфил с последующим проявлением хроматограмм смесью хлорида железа (III) с железосинеродистым калием или аммиакатом серебра с последующим облучением хроматограмм УФ-светом.
Отбор проб воздуха проводится с концентрированием на фильтре АФА-ВП-20 или АФА-ХА-20.
Нижний предел измерения:
0,05 нг (ГЖХ);
1 мкг (ТСХ)
в хроматографируемом объеме.
Нижний предел измерения в воздухе 0,5 мг/куб. м (ГЖХ, ТСХ) при отборе 100 л.
Диапазон измеряемых концентраций в воздухе:
0,5 - 10,0 мг/куб. м (ГЖХ);
0,5 - 3,0 мг/куб. м (ТСХ).
Измерению не мешают компоненты, входящие в состав гербицидных препаратов на основе дикамбы, в том числе диметиламин, диэтилэтаноламин, хлорсульфурон, а также хлорорганические пестициды.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 25%.
Время выполнения измерения, включая отбор проб:
около 2-х час. (ГЖХ);
около 2,5 час. (ТСХ).
2. Приборы, аппаратура и посуда
Газожидкостной хроматограф Цвет 500 М или аналогичный с детектором "по захвату электронов".
Хроматографические колонки длиной 170 см и 200 см, внутренним диаметром 3 мм.
Хроматографическая камера с пришлифованной крышкой по ГОСТ 25336-82 или аналогичная.
Аспирационное устройство с ротаметром для измерения расхода воздуха по ТУ 64-1-1081-73 или аналогичное.
Фильтродержатель.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76, или аналогичный.
Мерные колбы по ГОСТ 1770-74 вместимостью 100 мл.
Колбы грушевидные по ГОСТ 25336-82 вместимость 50 мл.
Пробирки градуированные с пробками на шлифах по ГОСТ 1770-74 вместимостью 5 и 10 мл.
Стеклянные химические стаканы по ГОСТ 25336-82 вместимостью 50 мл.
Пульверизаторы стеклянные по ГОСТ 25336-82.
Пипетки с делениями по ГОСТ 20292-74 на 0,1; 1 и 5 мл.
Микрошприцы на 100 и 10 мкл.
Хроматографические пластинки силуфол (Чехия) или сорбфил по ТУ 26-11-17-89.
Лампа ртутно-кварцевая по ТУ 16-535-280-74 или аналогичная.
Прибор для получения диазометана (рис. 1 - не приводится).
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76, или аналогичная.
3. Реактивы и материалы
Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79, перегнанный над KMnO и обезвоженный
4
над Na SO безводным.
2 4
Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78, свежеперегнанный.
Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74.
Диэтиловый эфир, хч, ГОСТ 6265-79.
Метиловый спирт, хч, ГОСТ 6995-77.
Этиловый спирт, ректификат, ГОСТ 5961-81и.
Этиловый спирт подкисленный (на 100 мл спирта одна капля ледяной уксусной кислоты).
Уксусная кислота, чда, ГОСТ 61-75, ледяная.
Калия гидроксид, хч, ГОСТ 24363-80.
Натрия сульфат, хч, ГОСТ 4166-76, безводный.
Хроматон N-AW-DMCS с 5% SE-30 (0,16 - 0,20 мм) или аналогичный носитель.
Хроматон N-AW-DMCS с 5% OV-17 (0,16 - 0,20 мм) или аналогичный носитель.
Серебро азотнокислое, AgNO , ГОСТ 1277-75.
3
Аммиак водный, ГОСТ 3760-79.
Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74, из баллона с редуктором.
Гидразин-гидрат, чда, ГОСТ 58322-65.
Фильтры АФА-ВП-20 или АФА-ХА-20.
Дикамба (2-метокси-3,6-дихлорбензойная кислота), хч, с содержанием основного вещества не менее 98%.
4. Отбор проб воздуха <*>
--------------------------------
<*> При отборе проб воздуха на фильтры АФА-ВП-20 или АФА-ХА-20 объемный расход воздуха при необходимости можно увеличить до 15 л/мин., что проверено экспериментально.
Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-20 или АФА-ХА-20, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 0,5 ПДК следует отобрать 100 л воздуха.
Пробы, отобранные на фильтр, хранят при комнатной температуре не более 5 дней.
5. Подготовка к измерению
5.1. Приготовление стандартных растворов
Стандартные растворы дикамбы в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл (раствор 1) и 1 мкг/мл (раствор 2).
Стандартный раствор 1 готовят растворением 10 мг дикамбы в ацетоне в мерной колбе вместимостью 100 мл. Для приготовления стандартного раствора 2 из раствора 1 пипеткой вместимостью 1 мл отбирают 1 мл и переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки ацетоном. Стандартные растворы 1 и 2 стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.
5.2. Для ГЖХ измерения
5.2.1. Приготовление диазометана
В круглодонную колбу вместимостью 100 мл (рис. 1), снабженную капельной воронкой с байпасом и обратным холодильником, помещают 12 г (0,2 моля) КОН, 6 мл метилового спирта, 6 мл или 6,1 г (0,12 моля) гидразингидрата. Колбу охлаждают до +5 °С смесью воды со льдом и начинают медленно, по каплям прибавлять из капельной воронки 10 мл (0,12 моля) хлороформа, постепенно увеличивая скорость. При этом реакционная масса становится желтой.
Выделяющийся в ходе реакции диазометан через обратный холодильник, соединенный с капилляром стеклянным переходом, поступает в двугорлую колбу-приемник 2 вместимостью 100 мл, содержащую 50 мл осушенного серного эфира. Колба 2 погружена в баню, содержащую смесь воды со льдом.
По окончании прибавления хлороформа реакционную колбу нагревают до 40 °С на водяной бане для полного удаления диазометана из реакционной массы. После обесцвечивания реакционной массы и стенок холодильника реакцию считают законченной. Диазометан хранят в склянке с притертой пробкой в морозильной камере.
5.2.2. Подготовка газохроматографической колонки
Для газохроматографического анализа используют готовый товарный носитель хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30 и хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% OV-17. Хроматографическую колонку заполняют насадкой с подсоединением слабого вакуума. Достаточная плотность набивки обеспечивается равномерной загрузкой и непрерывным постукиванием по колонке. Колонку кондиционируют при скорости азота 30 мл/мин. в режиме программирования температуры от 50 до 220 °С со скоростью нагрева 2 °С/мин., а затем в изотермическом режиме при температуре 220 °С в течение 6 - 8 час. без подсоединения колонки к детектору.
Общую подготовку прибора к работе проводят согласно инструкции.
5.3. Для ТСХ измерения
5.3.1. Приготовление градуировочных растворов
Градуировочные растворы дикамбы в ацетоне с концентрацией от 10 до 60 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора в пробирках с притертыми пробками вместимостью 5 мл согласно таблице.
Таблица
ШКАЛА ГРАДУИРОВОЧНЫХ РАСТВОРОВ
----------T---------------T---------T--------T------------------¬
¦ Номер ¦ Стандартный ¦Добавлено¦Концент-¦ Содержание ¦
¦стандарта¦ раствор ¦ ацетона,¦рация ¦ дикамбы в 0,1 мл ¦
¦ ¦ (100 мкг/мл), ¦ мл ¦дикамбы,¦хроматографируемой¦
¦ ¦ мл ¦ ¦мкг/мл ¦ пробы, мкг ¦
+---------+---------------+---------+--------+------------------+
¦1 ¦0,5 ¦4,5 ¦10 ¦1 ¦
¦2 ¦1,0 ¦4,0 ¦20 ¦2 ¦
¦3 ¦1,5 ¦3,5 ¦30 ¦3 ¦
¦4 ¦2,0 ¦3,0 ¦40 ¦4 ¦
¦5 ¦2,5 ¦2,5 ¦50 ¦5 ¦
¦6 ¦3,0 ¦2,0 ¦60 ¦6 ¦
L---------+---------------+---------+--------+-------------------
Допустимый срок хранения градуировочных растворов при комнатной температуре не более 10 дней.
5.3.2. Приготовление проявляющего раствора
Проявляющий реагент. Растворяют 0,5 г AgNO в 5 мл
3
дистиллированной воды, добавляют 5 мл концентрированного аммиака
до растворения осадка и добавляют 90 мл ацетона. Хранить в темном
месте.
5.3.3. Приготовление хроматографической камеры
Хроматографические камеры за 1 час до начала хроматографирования заливают смесью подвижных растворителей хлороформ:ацетон (3:1) и хлороформ:уксусная кислота (20:1). Объем подвижных растворителей в камере должен по высоте находиться не выше чем на 0,7 - 1,0 см от дна камеры.
6. Подготовка проб к анализу
Фильтр пинцетом вынимают из фильтродержателя, помещают в стакан вместимостью 50 мл и аккуратно с помощью пинцета и стеклянной палочки, сминают, добавляют 5 мл подкисленного этилового спирта. Фильтр несколько раз тщательно отжимают стеклянной палочкой в растворителе. Спиртовой раствор сливают в грушевидную колбу вместимостью 50 мл, осторожно придерживая фильтр стеклянной палочкой. Эту операцию повторяют еще два раза тем же количеством подкисленного спирта. Из грушевидной колбочки с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 5 мл ацетона, колбочку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем.
Для ТСХ измерения из полученного раствора отбирают аликвотную часть. Для ГЖХ измерения требуется дальнейшее разбавление. Для этой цели из полученного раствора пипеткой на 1 мл отбирают 1 мл, переносят в градуированную пробирку на 10 мл, доводят до 10 мл ацетоном, пробирку закрывают пробкой на шлифе и ее содержимое аккуратно перемешивают.
7. Проведение измерения
7.1. ГЖХ измерение
Из полученного для ГЖХ раствора (10 мл) в градуированную пробирку на 5 мл микропипеткой на 0,1 мл или микрошприцем на 100 мкл переносят 0,1 мл (100 мкл) раствора, слабым током воздуха полностью удаляют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл раствора диазометана в диэтиловом эфире. Через 10 - 15 мин. диазометан и эфир отдувают слабым током воздуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 4 мл гексана. Колбочку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно ополаскивают растворителем. В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора. Ввод проб осуществляется микрошприцем через самоуплотняющуюся мембрану хроматографа. Скорость ввода и объем вводимых проб должен быть постоянным.
Условия хроматографирования
Колонка 1 Колонка 2
Насадка колонки 5% SE-30 на 5% OV-17 на
хроматоне хроматоне
N-AW-DMCS N-AW-DMCS
(0,16 - 0,20 мм) (0,16 - 0,20 мм)
Длина и внутренний диаметр 170 см х 3 мм 200 см х 3 мм
колонки
-10 -10
Рабочая шкала электрометра 64 х 10 мА 64 х 10 мА
Скорость протяжки ленты 0,25 0,25
самописца см/мин.
Скорость потока 30 мл/мин. 25 мл/мин.
газа-носителя азота
Температура термостата 180 200
колонки, °С
Температура испарителя, °С 200 220
Температура детектора, °С 230 300
Абсолютное время удерживания 3 мин. 57 с 4 мин. 21 с
Объем вводимой пробы, мкл 2 2
Линейный диапазон 0,05 - 1,0 нг 0,05 - 1,0 нг
детектирования
Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом, по высоте пиков.
Серию стандартов готовят одновременно с рабочей пробой следующим образом: в 5 пробирок вместимостью 5 мл с пробками на шлифах пипеткой вносят из стандартного раствора 2 0,125; 0,250; 0,5; 1 и 2,5 мл, что соответствует 0,125; 0,250; 0,5; 1 и 2,5 мкг дикамбы. Из пробирок на горячей водяной бане или слабым током воздуха полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой одновременно с рабочей пробой добавляют по 2 мл раствора диазометана. Через 10 - 15 мин. эфир и диазометан отдувают слабым током воздуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 5 мл гексана. Пробирку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем. Параллельно с рабочей пробой в хроматограф вводят по 2 мкл полученных растворов. Расчет проводят по стандартному раствору, высота пика которого наиболее близка к высоте пика рабочей пробы.
7.2. ТСХ измерение
На пластинку силуфол или сорбфил микрошприцем на 100 мкл или микропипеткой с оттянутым концом наносят 100 мкл (0,1 мл) полученного по п. 6 раствора. Справа и слева от рабочей пробы таким же образом наносят серию стандартных растворов дикамбы (1, 2, 3, 4, 5, 6 мкг). Необходимо следить, чтобы диаметр пятна наносимого раствора не превышал 0,5 см.
После высушивания пятен пластинку помещают в
хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до начала
хроматографирования был налит подвижный растворитель. На
пластинках силуфол хроматограмму развивают в системе подвижных
растворителей хлороформ:уксусная кислота (40:1) или
хлороформ:этилацетат:уксусная кислота (15:15:1); на пластинках
сорбфил - сначала в системе хлороформ:ацетон (3:1), а затем,
после высушивания хроматограммы, в системе хлороформ:уксусная
кислота (20:1). После развития хроматограмму высушивают на
воздухе, а затем хроматограмму обрабатывают из пульверизатора
проявителем, после чего влажную пластинку помещают под
ртутно-кварцевую лампу и облучают ее УФ-светом в течение трех
минут. Дикамба на хроматограмме проявляется в виде коричневых
пятен на светло-сером фоне с R 0,45 +/- 0,05 в первой системе
f
подвижных растворителей и с 0,76 +/- 0,05 - во второй. Линейный
диапазон определения 1 - 6 мкг. Пятна стабильны в течение одного
часа.
Количественное определение дикамбы на хроматограммах проводят путем сравнения площади и интенсивности пятен рабочей пробы и серии стандартов.
8. Обработка результатов анализа
8.1. ГЖХ
Содержание дикамбы в воздухе (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:
С х Н х V х 500
ст рп
Х = ------------------- мл/куб. м,
Н х V х V
ст а 20
где:
С - количество стандарта, введенного в хроматограф, нг;
ст
Н - высота пика рабочей пробы, мм;
рп
Н - высота пика стандарта, мм;
ст
V - общий объем рабочего раствора, мл;
V - объем аликвоты, вводимой в хроматограф, мкл;
а
V - объем воздуха в л, отобранный для анализа и приведенный
20
к стандартным условиям (см. приложение 1 - не приводится);
500 - фактор разведения.
Если при введении в хроматограф получаются слишком большие пики или происходит "зашкаливание", к рабочему раствору пипеткой добавляют замеренное количество гексана и анализируют более разбавленный раствор.
8.2. ТСХ
Содержание дикамбы в воздухе (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:
С х V
Х = -------- мг/куб. м,
V х V
а 20
где:
С - содержание дикамбы, найденное в анализируемой пробе, мкг;
V - общий объем пробы, мл;
V - объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;
а
V - объем воздуха в л, отобранный для анализа и приведенный
20
к стандартным условиям.
При получении интенсивно окрашенных пятен, не подлежащих количественной оценке, объем V можно увеличивать путем добавления к рабочей пробе замеренного количества гексана или соответствующего разбавления отобранной аликвоты. Нижний предел определения при необходимости можно снизить за счет концентрирования рабочего раствора V до меньшего объема.
9. Требования к квалификации лиц, проводящих измерение
Лица, проводящие измерение, должны, по меньшей мере, иметь среднее химическое образование и стаж работы не менее одного года.
10. Требования безопасности
При работе необходимо соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химической лаборатории с пестицидами и легковоспламеняющимися растворителями, а также "Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР" № 2455-81 от 20.10.1981.
Соблюдать меры предосторожности при работе с ядовитым и взрывоопасным диазометаном.
Полное отсутствие открытого огня в лаборатории!!!
------------------------------------------------------------------
--------------------
| | |
|
